-
Điện thoại
+86-0755 2308 4243
-
Địa chỉ
Phòng 309, Tòa nhà Meihua, Khu công nghiệp Đài Loan, Số 2132 Đường Songbai, Quận Bảo An, Thâm Quyến, Trung Quốc
-
Thư điện tử
Câu hỏi thường gặp
Biorunstar sử dụng phương pháp tổng hợp nào để tổng hợp peptide?
RE: Biorunstar đã phát triển các phương pháp tổng hợp pha dung dịch khác nhau để đáp ứng yêu cầu của khách hàng. Thông thường, hóa học Fmoc pha rắn được áp dụng.
Làm thế nào để bạn vận chuyển peptide? Dữ liệu QC nào sẽ được cung cấp?
RE: Tất cả các peptide sẽ được vận chuyển bằng DHL hoặc FedEx express dưới dạng bột đông khô trong từng lọ được dán nhãn rõ ràng, ở nhiệt độ phòng. Ngoại trừ các peptide thô sẽ chỉ được kiểm tra bằng phép đo phổ MALDI-MASS, tất cả các peptide tinh khiết tổng hợp đều đi kèm với báo cáo dự án (CoA), dữ liệu MS và dữ liệu HPLC. các bảng dữ liệu sẽ được cung cấp có chứa các đặc điểm chính, chẳng hạn như trình tự peptide, độ tinh khiết, số lượng, sự biến đổi, dữ liệu phổ khối và dữ liệu HPLC.
Thời gian quay vòng điển hình để tổng hợp peptide là gì? Mất bao lâu để gửi hàng cho tôi?
RE: Thời gian hoàn thành thông thường của chúng tôi là 2-3 tuần đối với một peptide tiêu chuẩn dưới 30 axit amin. Thời gian quay vòng thay đổi tùy thuộc vào độ dài, số lượng, độ hòa tan và độ khó của peptide. Thông thường là 3-5 ngày để tiếp cận các nhà nghiên cứu ở các quốc gia khác.
Bạn có thể tổng hợp được bao lâu?
RE: Biorunstar có nhiều kinh nghiệm trong việc tổng hợp các peptide dài, lên tới 130aa. Không giống như nhiều nhà cung cấp peptide chỉ thoải mái sản xuất các peptide có kích thước dưới 30 hoặc 40aa, Biorunstar có kinh nghiệm tốt trong việc sản xuất các peptide có kích thước từ 40aa đến 90aa. Rất khó để tổng hợp các peptide dài, đặc biệt là 100aa hoặc dài hơn. Nếu bạn dự định tổng hợp chuỗi 130aa hoặc dài hơn, vui lòng liên hệ với chúng tôi để có dịch vụ tinh chế và biểu hiện protein tùy chỉnh.
Điều gì sẽ xảy ra nếu một số vấn đề xảy ra trong quá trình tổng hợp hoặc tinh chế?
RE: Mỗi peptide có những đặc điểm riêng. Nếu một số vấn đề xảy ra trong quá trình tổng hợp ngoài mong đợi của chúng tôi và chúng tôi không thể cung cấp peptide của bạn đúng thời gian, chúng tôi sẽ thông báo cho bạn sớm nhất có thể. Trong trường hợp chúng tôi không thể tạo ra peptit, bạn sẽ không phải trả bất kỳ chi phí nào.
Dạng muối TFA, dạng muối Acetate hoặc HCl: Nên chọn dạng nào?
Theo mặc định, peptide được tổng hợp trong muối TFA. Đối với các thí nghiệm liên quan đến nuôi cấy tế bào hoặc mô, bạn nên cân nhắc việc sản xuất peptide ở dạng muối axetat hoặc HCl ở mức 98% hoặc cao hơn để tránh phản ứng bất thường. Dạng muối axetat hoặc HCl có thể được yêu cầu với chi phí bổ sung.
Thời hạn sử dụng của peptide là gì?
RE: Peptide ổn định tối thiểu một năm nếu được bảo quản đông khô trong tủ đông. Nếu peptide bị hòa tan, thời hạn sử dụng có thể giảm. Nếu peptide chứa một số axit amin phản ứng có thể bị oxy hóa như Trp, Met nhưng đặc biệt là Cys thì thời hạn sử dụng cũng có thể bị giảm.
Peptide chứa một số cystein và do đó có thể dễ dàng hình thành liên kết disulfide. Làm cách nào để tránh điều này?
RE: Nếu chuỗi peptide chứa một số cystein hoặc các axit amin phản ứng khác dễ bị oxy hóa, Biorunstar sẽ cung cấp peptide có dấu vết của chất khử mạnh DTT. Peptide chỉ được phân phối cùng với DTT nếu điều này được khách hàng cho phép cụ thể.
Làm cách nào để lưu trữ peptide tổng hợp của tôi?
RE: Hầu hết các peptit đông khô sẽ ổn định ở nhiệt độ phòng trong 2-3 tuần. Để bảo quản lâu dài, bạn nên bảo quản peptide đông khô ở nhiệt độ -20 . Nên tránh chu kỳ đóng băng-tan băng lặp đi lặp lại. Để đến nhiệt độ phòng trước khi mở. Thời hạn sử dụng của dung dịch peptide có hạn; nên sử dụng dung dịch peptide sau khi đã chuẩn bị càng sớm càng tốt.
Độ tinh khiết của peptit thô và peptit khử muối là bao nhiêu? Làm thế nào để bạn tinh chế peptide? Các tạp chất là gì?
RE: Đối với các peptide ngắn có trình tự bình thường dưới 15aa, HPLC thường là 40-60%% đối với loại thô; 50-70% theo HPLC cho loại đã khử muối. Peptide càng dài thì độ tinh khiết ở dạng thô hoặc đã khử muối càng thấp. Các peptide thường được tinh chế bằng HPLC bằng cách sử dụng gradient nước và acetonitril. Hầu hết các tạp chất là các đoạn hoặc các peptide bị xóa, các peptide được bảo vệ không hoàn toàn, muối và nước còn sót lại.
Giải thích về độ tinh khiết của peptit bằng HPLC, hàm lượng peptit tổng và hàm lượng peptit mục tiêu.
RE: Biorunstar vận chuyển peptide theo tổng trọng lượng của bột đông khô. Bột đông khô bao gồm các tạp chất như các đoạn hoặc các peptit bị xóa, các peptit được khử bảo vệ không hoàn toàn, TFA và nước dư. Độ tinh khiết của peptide được đo bằng HPLC. Đó là lượng peptide chính xác so với tất cả các chất phân tích hấp thụ ở ~214 nm (liên kết peptide hấp thụ), rất có thể bị xóa, cắt bớt hoặc các chuỗi được bảo vệ không hoàn toàn, v.v. Độ tinh khiết của peptide bằng HPLC không tính đến nước và muối thường có trong mẫu. Tổng hàm lượng peptide là tỷ lệ phần trăm của tổng số peptide có liên quan đến mọi thứ có trong bột peptide đông khô. Tổng hàm lượng peptide được xác định bằng phân tích hàm lượng nitơ. Do đó, hàm lượng peptide mục tiêu trong bột peptide đông khô có thể được kết luận bằng công thức: Tổng hàm lượng peptide X Độ tinh khiết peptide bằng HPLC.
Phương pháp ghi nhãn Fluorescein là gì?
RE: FITC (Fluorescein isothiocyanate) là tiền chất được kích hoạt dùng để dán nhãn Fluorescein. Để ghi nhãn Nterminal hiệu quả, aminohexanoyl bảy nguyên tử
miếng đệm (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) được chèn vào giữa fluorophore (fluoroscein) và Đầu N của peptit. Miếng đệm này giúp tách fluorophore khỏi điểm gắn của nó, có khả năng làm giảm sự tương tác của fluorophore với phân tử sinh học mà nó được liên hợp và làm cho nó dễ tiếp cận hơn với các thuốc thử phát hiện thứ cấp.
miếng đệm (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) được chèn vào giữa fluorophore (fluoroscein) và Đầu N của peptit. Miếng đệm này giúp tách fluorophore khỏi điểm gắn của nó, có khả năng làm giảm sự tương tác của fluorophore với phân tử sinh học mà nó được liên hợp và làm cho nó dễ tiếp cận hơn với các thuốc thử phát hiện thứ cấp.
Có thể dán nhãn đầu cuối C của Biotin (hoặc FITC) không?
LẠI: Vâng. Việc ghi nhãn ở đầu C của Biotin (hoặc FITC) được thực hiện bằng cách bổ sung dư lượng Lysine ở đầu C của peptit và Biotin (hoặc FITC) được gắn vào chuỗi bên Lysine thông qua liên kết amit. Điện tích dương của Lysine bị loại bỏ.
Độ dài peptide thích hợp để sản xuất kháng thể là bao nhiêu?
RE: Nói chung, nên sử dụng peptide dư 10-25. Một peptit dài hơn có thể có nhiều epitop hơn, nhưng cũng có thể có nhiều khả năng hình thành các cấu trúc thứ cấp ổn định hơn, không phải là dạng tự nhiên. Một peptit ngắn hơn (<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.
BẢN ĐỒ là gì?
RE: MAPS hoặc Peptide đa kháng nguyên là một peptide phân nhánh trong đó các chuỗi peptide tuyến tính được liên kết tại đầu C của chúng thông qua lõi polylysine, do đó làm tăng kích thước của toàn bộ phân tử. Điều này được thực hiện để loại bỏ sự ghép nối của peptide với KLH. Tuy nhiên, có vẻ như cấu trúc của các peptide trên MAP kém linh hoạt hơn và các kháng thể thu được từ MAP thường nhận ra protein mục tiêu ít thường xuyên hơn so với cách liên hợp KLH thông thường. Ngoài ra, không có peptide tự do nào được tạo ra khi tạo MAPS, gây khó khăn cho việc loại bỏ các kháng thể định hướng lõi polylysine. Việc tinh chế MAPS bằng HPLC rất khó và MAPS được cung cấp mà không cần xác minh hàng loạt do tính không đồng nhất và kích thước phân tử lớn của nó.
Tại sao dung dịch peptide liên hợp KLH của tôi lại bị đục?
RE: KLH hoặc Keyhole Limpet Hemocyanin là một loại protein tổng hợp lớn (MW=4x105 – 1x107). Do kích thước và cấu trúc của nó nên khả năng hòa tan trong nước của nó bị hạn chế, gây ra hiện tượng đục. Điều này sẽ không ảnh hưởng đến khả năng sinh miễn dịch và dung dịch đục có thể được sử dụng để gây miễn dịch.
Bạn có thể giải thích các đỉnh khối lượng M+Na và M+K trong phổ MALDI không?
RE: Người ta thường thấy các chất cộng Na (natri) và K (kali) trong phổ MALDI. Natri và kali đến từ nước được sử dụng trong dung môi peptit. Ngay cả nước cất và nước khử ion cũng có một lượng nhỏ ion natri và kali, không bao giờ có thể loại bỏ hoàn toàn. Chúng bị ion hóa trong quá trình xác định khối lượng MALDI và liên kết với các nhóm carboxyl tự do của peptide. Bởi vì không có hệ thống lọc nước nào có thể loại bỏ từng ion natri hoặc kali khỏi nước, nên đôi khi việc nhìn thấy các chất cộng natri và kali là rất phổ biến và không thể tránh khỏi trong thông số khối lượng MALDI. Đây không phải là dấu hiệu cho thấy peptide không tinh khiết và cũng không nên nhầm lẫn với trọng lượng phân tử không chính xác.